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第124期病毒、疫苗純化的最佳選擇——QuikSep Sulfate

2019年10月22日來源:管理員
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在生物技術領域,常使用親和色譜法進行病毒、蛋白的純化。親和色譜法屬于吸附色譜法的一種,目標物質有選擇地吸附于色譜柱填料的配體上,然后通過更改緩沖液達到分離、回收的目的。使用親和色譜法回收目標成分,可以比凝膠過濾或離子交換色譜法的精度高出很多。

QuikSep Sulfate是一種特定的親和填料,適用于部分病毒、病毒樣顆粒以及某些特定的抗原和蛋白(見表2)的分離純化。

特點:

1.?????? 快速、簡單(一步純化)。

2.?????? 載量高。

3.?????? 易于放大。

1:性能參數

介質

QuikSep Sulfate

基質

高剛性瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

90μm

溶菌酶載量

≥3mg/ml 介質

pH穩定性

5-12(長期) 5-12(短期)

操作壓力

≤0.3MPa

流速

16mm× 300mm,0.1MPa300cm/h

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30

?

2QuikSep Sulfate適用性

Viruses

Viral/Microbial Agents

Rabies

Influenza ?

Japanese ? Enchephalitis

Feline ? Leukemia

Feline ? Herpes

Feline ? Calicivirus

Respiratory ? Syncytial Virus

Human ? Herpes Simplex

Human ? Measles

Human ? Parainfluenza

Herpes ? Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits

Hepatitis ? B Surface Antigen

Filamentous ? Hemagglutinin from B. pertussis

Leucocytosis ? Promoting Factor Hemagglutinin

?

?

QuikSep Sulfate純化狂犬病毒層析工藝

?

1. 層析柱

介質:QuikSep Sulfate; 規格:1ml 預裝柱

?

2. 樣品預處理

高倍濃縮后的樣品用平衡液稀釋 20 倍,上樣前 0.45um 過濾,0.45um 過濾。

?

3. 緩沖液

A10mM PB,pH 7.2; B10mM PB,1M NaCl,pH 7.2。

備注:所有溶液需 0.45um 過濾。

?

4. 純化過程

流速:1ml/min 或者 30cm/h;

平衡:溶液 A 平衡 10CVCV 指柱體積,下同);

上樣:上樣 30CV;

清洗:溶液 A 平衡 10CV;

洗脫:溶液 B 洗脫 10CV,收集洗脫液。

?

5. 純化圖譜

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?QQ截圖20191022082740.jpg


5. 檢測結果


體積

ml

蛋白濃度

ug/ml

抗原含量

IU/ml

蛋白去除率

%

收率

%

濃縮倍數

純化倍數

原液

30

615

1.51

94

75.4

11

13

流穿液

30

557

0.22

洗脫液

2

531

17.08

?

7. 結論

該懸浮培養狂犬病毒純化工藝中,病毒與 QuikSep Sulfate進行吸附結合,洗脫液中蛋白去除率≈94%,回收率≈75.4% 。

8. 訂購信息

產品

規格(ml)

貨號

QuikSep Sulfate

25

HZ1010-1

QuikSep Sulfate

100

HZ1010-1

QuikSep Sulfate

500

HZ1010-1

QuikSep Sulfate

1000

HZ1010-1


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